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（17分）基因工程又叫基因拼接技術(shù)。

（1）在基因工程技術(shù)中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉(zhuǎn)錄的       為模板，   　   成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受體細胞有細菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技術(shù)中，DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大腸桿菌質(zhì)粒經(jīng)EcoRI（一種限制性核酸內(nèi)切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，則EcoRI的識別序列和切點是_____________________（切點用箭頭標(biāo)在序列上）。

（5）將目的基因?qū)�入植物細胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是通過這種方法獲得。除此法之外，還有____________和____________等。

（6）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR技術(shù)）是在實驗室中以少量樣品DNA制備大量DNA的生化技術(shù).某個DNA樣品有1000個脫氧核苷酸，已知它的一條單鏈上堿基A:G:T:C=1:2:3:4，則經(jīng)過PCR儀五次循環(huán)后，將產(chǎn)生     個DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)量至少是           個。請指出PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)錄過程的二個不同之處：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一個基因表達載體的組成，除了目的基因之外，還必須有      ，       以

及             。[來源:學(xué)#科#網(wǎng)Z#X#X#K]

（8）在目的基因的監(jiān)測與鑒定工作中，又是需監(jiān)測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，監(jiān)測的方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行             雜交，若有           出現(xiàn)，表面目的基因已經(jīng)形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。

控制哺乳動物的性別對于畜牧業(yè)生產(chǎn)有著十分重要的意義。目前，分離精子技術(shù)是有效的性別控制方法。例如：牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右，利用這一差異人們借助特殊儀器將它們分離開來，再通過胚胎工程技術(shù)就可培育出所需性別的試管牛（如下圖所示）。

根據(jù)以上信息回答下列相關(guān)問題：

（1）圖中過程①通常采用的是__________技術(shù)，在這個過程中_________的精子與卵細胞結(jié)合形成受精卵。為獲得更多的卵細胞需要給良種母牛注射適宜劑量的__________。

（2）過程②中受精卵培養(yǎng)發(fā)育至________時期，再經(jīng)胚胎移植到代孕母牛，從而獲得后代。若希望同時獲得多個性狀相同的個體，可以使用__________技術(shù)。

（3）動物“生物反應(yīng)器”是轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)中最誘人的部分之一。為了提高牛奶中賴氨酸的含量，某大學(xué)研究人員利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，得到了一頭轉(zhuǎn)入外源賴氨酸基因的克隆奶牛，預(yù)計將來其分泌的乳汁中含有更多的賴氨酸。下圖為培育轉(zhuǎn)基因克隆動物的技術(shù)流程圖，獲得外源賴氨酸基因所需要的工具酶是__________。該基因不能從人體細胞中獲得，原因是____________________。

已知該奶牛培育過程中所用受體細胞為一只雌性奶牛胎兒的成纖維細胞，導(dǎo)入目的基因常用的方法是_________________，把該含有外源基因的受體細胞培育成為一頭奶牛還需要用到的技術(shù)有____________________（至少寫出兩種）。

（15分）請回答下列有關(guān)生物工程的問題：

（1）對于基因工程來說，其核心步驟是                ，若要培育能從乳汁中分泌人的干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，需要選擇的受體細胞是____________(受精卵、乳腺細胞)，導(dǎo)入該細胞最有效的方法是                。為了讓轉(zhuǎn)入的干擾素基因高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的             和             之間。

（2）植物體細胞雜交過程中，在把植物細胞雜交之前，必須用____________去除細胞壁，雜交過程的另一個環(huán)節(jié)是__________________；培育出諸如“番茄—馬鈴薯”這樣的雜種植株利用了植物細胞全能性的原理。胚胎干細胞也有類似的特性，并且胚胎干細胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生        。

（3）在進行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細胞進行融合，這兩種細胞一種是在體外能夠大量增殖的             ，另外一種是已免疫的B細胞；誘導(dǎo)該兩種細胞融合常用的因素有PEG、        、滅活病毒等。體外培養(yǎng)的過程中，貼壁生長的細胞會出現(xiàn)_________現(xiàn)象。

（4）在“試管牛”的培育過程中，要使精子和卵母細胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進行處理，使其             。另外，培養(yǎng)的卵母細胞需要發(fā)育至                             期，為使雌性個體一次排出多枚卵母細胞，常采用             激素進行處理。

（5）“桑基魚塘”生態(tài)系統(tǒng)能充分利用廢棄物中的能量，形成“無廢棄物農(nóng)業(yè)”，這主要是遵循生態(tài)工程的             原理。

【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）   。
（1）對于基因工程來說，其核心是                               ；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法�?u>                      。
（2）植物體細胞雜交過程有兩個關(guān)鍵，一個是在把植物細胞雜交之前，必須               
                   ；另外一個是                                 。
（3）在進行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細胞進行融合，一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細胞，另外一種是                      ；誘導(dǎo)該兩種細胞融合常用的因素有PEG、電激、                    等。
（4）胚胎干細胞在功能上具有發(fā)育的              性，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生           。
（5）家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。
①進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞。
②為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。
③采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反應(yīng)過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是                                              。
利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）   。

（1）對于基因工程來說，其核心是                               ；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法�?u>                      。

（2）植物體細胞雜交過程有兩個關(guān)鍵，一個是在把植物細胞雜交之前，必須               

                   ；另外一個是                                 。

（3）在進行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細胞進行融合，一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細胞，另外一種是                      ；誘導(dǎo)該兩種細胞融合常用的因素有PEG、電激、                    等。

（4）胚胎干細胞在功能上具有發(fā)育的              性，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生           。

（5）家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。

①進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞。

②為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_________和___________之間。

③采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反應(yīng)過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是                                              。

利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換。