Question

【題目】菊天牛是菊花的主要害蟲之一。科研人員將抗蟲基因轉入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉基因菊花的技術流程，請據圖回答：

注：卡那霉素抗性基因(Kanr)作為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感。

(1)為了促進土壤農桿菌吸收重組質粒，可用__________處理土壤農桿菌，使其處于感受態(tài)。

(2)將重組質粒導入土壤農桿菌的目的是利用農桿菌能夠_________________________的特點，使目的基因進入受體細胞中，并插入到菊花細胞的________________上，最終形成轉基因植株。

(3)將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素和________的培養(yǎng)基中，在適宜條件下進行培養(yǎng)，篩選轉基因菊花。

(4)用PCR方法檢測轉基因菊花是否含有目的基因時，需根據____________________的核苷酸序列設計特異引物，以____________________為模板進行第一輪擴增。

(5)將轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲，實驗結果如下表所示。

①對照組應飼喂等量的_____________________________。

②據表分析，________________________差異顯著，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

Answer 1

【答案】Ca2+（或“CaCl2”） 感染菊花（或“植物”）細胞，并將T-DNA轉移至受體細胞 染色體DNA 卡那霉素 抗蟲基因（目的基因） 轉基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”） 非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物 實驗組與對照組死亡率

【解析】

分析題圖：圖示為獲得轉基因菊花的技術流程圖。目的基因（抗蟲基因）和質粒構建基因表達；采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞；再采用植物組織培養(yǎng)技術將受體細胞培養(yǎng)成轉基因植株。

分析表格：實驗組的死亡率明顯高于對照組。

⑴通常用鈣離子處理細菌，使之處于感受態(tài)。

⑵根據農桿菌的Ti質粒中的T—DNA可以整合到受體細胞的染色體DNA上的特點，通常用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞。

⑶基因表達載體的構建中，需要標記基因，根據題意可知該標記基因為卡那霉素，因此需要在加入卡那霉素的培養(yǎng)基中選擇出成功轉入目的基因的菊花。

⑷利用PCR技術擴增目的基因時，需要根據目的基因的脫氧核苷酸序列設計引物，同時利用含有目的基因的DNA為模板進行擴增。

⑸實驗設計遵循對照原則，因此對照組應該加入非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物；根據實驗組比對照組的死亡率高，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。