Question

【題目】 I．為研究肝癌致病機理，利用下圖所示方法和基因工程獲取相關(guān)癌基因以進一步研究。

（1）上圖中，A過程需要用________酶，D過程需要回收________（未雜交/雜交分子）的含32P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成，獲得________，并用其構(gòu)建基因文庫。

II．上圖是治療性克隆時獲取病人胚胎干細胞的過程。

（2）細胞①是病人的體細胞（如皮膚細胞），細胞②往往是處于_________期的卵母細胞。圖示方法一和方法二都使用了去核卵母細胞，主要是因為_____________________。

（3）將分離出的胚胎干細胞放入有分化誘導因子的培養(yǎng)液中，誘導其分化成所需類型細胞或器官，完成該過程的實質(zhì)是____________________。對于先天不能生成T細胞的免疫缺陷病人，需要誘導產(chǎn)生_________（填免疫器官）。

Answer 1

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄 未雜交 雙鏈cDNA 減數(shù)第二次分裂中期 卵母細胞的細胞質(zhì)可以給體細胞的細胞核提供表達全能性的環(huán)境 基因的選擇性表達 胸腺

【解析】本題考查基因工程中目的基因的提取、胚胎工程中的核移植等相關(guān)知識，解題要點是通過對圖示內(nèi)容的分析，掌握教材中生物工程相關(guān)的概念和操作步驟。

圖中A過程是以mRNA為模板合成單鏈DNA過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶；由于正常細胞中不含癌基因，所以將正常細胞轉(zhuǎn)錄成的mRNA和肝癌細胞的mRNA逆轉(zhuǎn)錄成的cDNA混合后，含癌基因的cDNA不能形成雜交分子，將未雜交分子回收后，經(jīng)人工合成的雙鏈cDNA中含有癌基因，可用其構(gòu)建基因文庫。

（2）圖中方法一為核移植技術(shù)，取病人體細胞（細胞①）的核，與處于減數(shù)第二次分裂中期的卵細胞（細胞②）的質(zhì)形成重組細胞。核移植中供質(zhì)的細胞一般取用去核卵母細胞，是因為卵母細胞的細胞質(zhì)可以給體細胞的細胞核提供表達全能性的環(huán)境，有利于細胞核全能性的表達。

（3）細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達；骨髓干細胞增殖后，部分細胞遷移至胸腺中分化成T細胞，所以對于先天不能生成T細胞的免疫缺陷病人，需要誘導產(chǎn)生胸腺。

[點睛]：本題知識易錯點：1.如何從肝癌細胞中篩選出目的基因（癌基因）：正常細胞與癌細胞相比，不含癌基因轉(zhuǎn)錄成的mRNA，由此根據(jù)DNA分子雜交原理，可篩選出未雜交分子，即含癌基因的cDNA；2. 克隆技術(shù)的圖示方法一和方法二都使用了去核卵母細胞，主要是因為卵母細胞的細胞質(zhì)可以給體細胞的細胞核提供表達全能性的環(huán)境，兩種方法得到的細胞③和④相當于受精卵，處于⑤時期的胚胎叫囊胚。